Image J软件进行图片条带灰度值分析
我们经常做完western实验时需要对图片中的灰度值进行分析,下面我就介绍一下image的使用攻略。
操作方法
(01)打开图片,转化为 8-bit 灰度图Image→Type→8bit;
(02)消 除 背 景 Process →Substratebackground 选中预览(Preview),选择合适的像素值(本例为 30)。
(03)方框工具选择并画出条带 1,Analyze→Gels→Select First Lane(快捷键 Ctrl+1 或数字 1)
(04)在第一个边框边缘左键拖动移至第二条带,Analyze→Gels→Select Next Lane (或 Ctrl+2),重复该步骤,(快捷键一直都是 Ctrl+2 或数字 2);
(05)所 有 边 框 选 择 完 毕 后 ,Analyze→Gels→Plot Lanes (快捷键 Ctrl+3 或 3)。提示:Ctrl+3 不能多次按,可改为 Analyse →Gels→Re plot Lanes
(06)Plot Lanes 后将出现条带的灰度曲线图,通过条带所在位置的曲线围成的面积得出其辉度或密度值。
(07)首先通过直线工具将峰值部分封闭,如箭头处所示。(也可添加垂直方向的线)
(08)选择魔棒工具,选中封闭区域,即可显示其面积,也就是对应条带的辉度值(图中 2 峰得出的值分别为6166.598 和 2995.477,所代表的条带被窗口挡住了。)
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