定量PCR引物设计
在微信小程序-引物库中搜索miRNA茎环引物和定量PCR引物,以及人、大鼠、小鼠和水稻等的定量PCR引物
操作方法
(01)在微信小程序中搜索引物库,添加如果需要搜索miRNA茎环引物和定量PCR引物,则点击mRNA,切换数据库。如果需要搜索大鼠、小鼠或者别的物种,点击Homo,切换物种
(02)输入需要搜索的基因名,点击‘查询’,引物库会自动搜索,输出含有输入基因名的候选基因,输入的名字越准确,搜索出来的基因越少。
(03)点击基因名,给出该基因的相关注释和引物信息
(04)点击上面一部分的注释信息,会给出更详细的注释信息
(05)点击下面引物序列,则给出引物的详细信息,包括引物的位置,所在的外显子,Tm值,扩增产物长度,以及该引物在目标物种mRNA数据库中的epcr结果,预测引物是否存在非特异性扩增
(06)点击“文档”,则给出引物库构建过程中用到的相关信息,包括序列选择的原则,引物设计的参数,以及定量PCR反应体系和反应程序,定量PCR结果的算法
(07)点击“个人”,给出了最近搜索的基因,收藏的基因以及评论过的基因
特别提示
输入的基因名不能有字母错误
引物选择时,尽量选第一对引物和第二对引物
如果2对引物,做出的结果都不理想,需要重新分析一下实验过程,不能盲目的继续合成调试引物
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