重組質粒的電轉化法

最近小編收到很多問題，其中一個就是下面小編爲大家整理一下關於重組質粒的電轉化法的步驟，希望這些方法能夠幫助到大家。

操作方法

（01）首先，將0.1cm的電擊杯放在冰上進行預冷，凍存的感受態細胞取出冰上溶解。

（02）然後，用100微升的感受態細胞加入1微升純化的連接液，或者加入0.5微升未純化的連接液，小心混勻，在冰上放置二十分鐘。

（03）然後，將混合液加入預冷的電擊杯中，注意擦乾杯外的水，防止電火花，放入電轉化儀的反應槽內，接上電源。

（04）然後，在3kv、200電阻和25微F的BioRad電轉化儀，0.2電轉化杯，時間常數在4.5-5ms之間，然後進行點擊。

（05）然後，在聽到蜂鳴聲後，向電擊杯中迅速加入1ml37攝氏度的保溫的SOC液體培養基，將混合液洗出，轉移到1.5ml的離心管中。

（06）最後，在37攝氏度220-250r/min復甦培養一小時，使其充分表達抗性，取適量塗平板，將平板倒置在培養箱中，37攝氏度下培養16-24小時。

上述方法爲小編整理所得，希望能夠幫助到大家。

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