定量PCR引物設計
在微信小程序-引物庫中搜索miRNA莖環引物和定量PCR引物,以及人、大鼠、小鼠和水稻等的定量PCR引物
操作方法
(01)在微信小程序中搜索引物庫,添加如果需要搜索miRNA莖環引物和定量PCR引物,則點擊mRNA,切換數據庫。如果需要搜索大鼠、小鼠或者別的物種,點擊Homo,切換物種
(02)輸入需要搜索的基因名,點擊‘查詢’,引物庫會自動搜索,輸出含有輸入基因名的候選基因,輸入的名字越準確,搜索出來的基因越少。
(03)點擊基因名,給出該基因的相關注釋和引物信息
(04)點擊上面一部分的註釋信息,會給出更詳細的註釋信息
(05)點擊下面引物序列,則給出引物的詳細信息,包括引物的位置,所在的外顯子,Tm值,擴增產物長度,以及該引物在目標物種mRNA數據庫中的epcr結果,預測引物是否存在非特異性擴增
(06)點擊“文檔”,則給出引物庫構建過程中用到的相關信息,包括序列選擇的原則,引物設計的參數,以及定量PCR反應體系和反應程序,定量PCR結果的算法
(07)點擊“個人”,給出了最近搜索的基因,收藏的基因以及評論過的基因
特別提示
輸入的基因名不能有字母錯誤
引物選擇時,儘量選第一對引物和第二對引物
如果2對引物,做出的結果都不理想,需要重新分析一下實驗過程,不能盲目的繼續合成調試引物
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