Image J軟件進行圖片條帶灰度值分析
我們經常做完western實驗時需要對圖片中的灰度值進行分析,下面我就介紹一下image的使用攻略。
操作方法
(01)開啟圖片,轉化爲 8-bit 灰度圖Image→Type→8bit;
(02)消 除 背 景 Process →Substratebackground 選中預覽(Preview),選擇合適的像素值(本例爲 30)。
(03)方框工具選擇並畫出條帶 1,Analyze→Gels→Select First Lane(快速鍵 Ctrl+1 或數字 1)
(04)在第一個邊框邊緣左鍵拖動移至第二條帶,Analyze→Gels→Select Next Lane (或 Ctrl+2),重複該步驟,(快速鍵一直都是 Ctrl+2 或數字 2);
(05)所 有 邊 框 選 擇 完 畢 後 ,Analyze→Gels→Plot Lanes (快速鍵 Ctrl+3 或 3)。提示:Ctrl+3 不能多次按,可改爲 Analyse →Gels→Re plot Lanes
(06)Plot Lanes 後將出現條帶的灰度曲線圖,透過條帶所在位置的曲線圍成的面積得出其輝度或密度值。
(07)首先透過直線工具將峯值部分封閉,如箭頭處所示。(也可添加垂直方向的線)
(08)選擇魔棒工具,選中封閉區域,即可顯示其面積,也就是對應條帶的輝度值(圖中 2 峯得出的值分別爲6166.598 和 2995.477,所代表的條帶被視窗擋住了。)
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