葉綠體色素的提取與分離方法
最近小編收到很多問題,其中一個就是下面小編爲大家整理一下關於葉綠體色素的提取與分離方法的步驟,希望這些方法能夠幫助到大家。
操作方法
(01)稱取新鮮去大葉脈的菠菜葉片,或芹菜、油菜等其他植物的新鮮綠葉5 g,剪碎放人研鉢中,加入乙醇5 ml、少許CaCO3,中和細胞中的酸防止Mg, 從葉綠素中心釋放,和石英砂,研磨成勻漿,再加入適量的乙醇20~25 ml,然後用漏斗過濾,即得葉綠體色素液。
(02)若用千粉時,則稱取1g 乾粉放人小燒杯中,加95%乙醇20~30 ml 提取,並隨時攪動。待乙醇呈深綠色時,濾出浸提液備用。取準備好的濾紙條(2cmX20cm),將其一端剪去兩側,中間留一個長約1.5cm,寬約0.5cm的窄條。
(03)用毛細管吸取葉綠體色素提取液點於濾紙的下端窄條的上方中央,注意一次所點溶液不可過多,如色素過淡,用電吹風吹千後再重複1~2 次。
(04)在大試管中加入汽油5~10ml,或其他層析液,如石油醚:丙酮苯體積比爲20 :2 :1的混合溶液,然後將濾紙條上端固定在軟術塞上,插人試管內,使窄條進入溶液中,色素點要略高於液麪,濾紙條邊緣不可碰到試管壁,蓋緊軟木塞,直立於陰暗處,或試管外套一黑紙套。
(05)經0.5~1h後,觀察分離後色素帶的分佈。最上端橙黃色的是胡蘿蔔素,其次爲葉黃素,再下面藍綠色爲Chl a,最後的黃綠色爲Chl b。
(06)取葉綠體色素提取液少許於1支試管中,用反射光和透射光觀察提取液的顏色有何不同,反射光下觀察到的提取液顏色即爲葉綠素產生的熒光顏色。取葉綠體色素提取液少許,分裝於兩支試管,光對葉綠素的破壞作用中,一支放在黑暗處(或用黑紙套包裹),另一支放在強光下(陽光下),經過2~3h後,觀察兩支試管中溶液的顏色有何不同。
特別提示
上述方法爲小編整理所得,希望能夠幫助到大家。
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